طراحی، ترانسفورماسیون و تکثیر ایزوفرم نوترکیبvegf۱۱۱b در e. coli top۱۰ برای تولید داروی نوترکیب
نویسندگان
چکیده
سابقه و هدف: سنتز پروتئینهای نوترکیب با خاصیت مهار گیرنده های رشد در تومورهای سرطانی یکی از راه های جدید درمان سرطان است. هدف مطالعه حاضر طراحی و کلون ایزوفرم نوترکیبvegf111b در وکتور pbudce4.1 و بررسی سازگاری این سازه با باکتری e. coli top10 جهت تولید داروی نوترکیب است. مواد و روش ها: ایزوفرم جدید vegf111b با استفاده از توالیهای موجود در بانکهای ژنی و نرمافزار 7 oligoطراحی شده و توسط آنزیمهای bglii و kpni بریده شده و در پایین دست پروموتور ef-1 در وکتور pbudce4.1 کلون شد. وکتور نوترکیب pbud.vegf111b توسط روش کلرید کلسیم در باکتری e. coli top10 ترانسفورم شد. جداسازی باکتری های نوترکیب در محیط lba حاوی غلظت 3/0 و 5/0 درصد آنتیبیوتیک زئوسین انجام شد. در مرحله آخر وکتور نوترکیب با استفاده از کیت استخراج dna از ژل (thermo k0513) استخراج شده و وجود قطعه نوترکیب vegf111b توسط هضم آنزیمی و تعیین توالی تائید شد. نتایج: الحاق قطعه 111b در جایگاه مورد نظر تائید شد. تمامی کلونیهای e. coli top10 مشاهده شده در محیط حاوی غلظت 0/5 درصد زئوسین حاوی قطعه نوترکیب vegf111b بودند و در غلظت 0/3 درصد زئوسین، 61/9 درصد کلونی نوترکیب مشاهده شد. وجود توالیvegf111b در باکتری های نوترکیب توسط هضم آنزیمی و تعیین توالی تائید شد. نتیجه گیری: مطالعه حاضر گامی مهم در جهت تولید داروی نوترکیبvegf111b و بررسی عملکرد ضد سرطانی این پروتئین است. وکتورpbudce4.1 با دارا بودن 2 جایگاه کلونینگ و 8 جایگاه برش آنزیمی کاندید مناسبی برای کلونینگ و بیان پروتئین های نوترکیب در e. coli top10 است.
منابع مشابه
طراحی، ترانسفورماسیون و تکثیر ایزوفرم نوترکیبVEGF111b در E. coli Top10 برای تولید داروی نوترکیب
سابقه و هدف: سنتز پروتئین های نوترکیب با خاصیت مهار گیرنده های رشد در تومورهای سرطانی یکی از راه های جدید درمان سرطان است. هدف مطالعه حاضر طراحی و کلون ایزوفرم نوترکیبVEGF111b در وکتور pBudCE4.1 و بررسی سازگاری این سازه با باکتری E. coli Top10 جهت تولید داروی نوترکیب است. مواد و روش ها: ایزوفرم جدید VEGF111b با استفاده از توالیهای موجود در بانکهای ژنی و نرمافزار 7 oligoطراحی شده و ت...
متن کاملکلونینگ و بررسی بیان ژن کد کننده BMP-2 انسانی در باکتری E. coli به منظور تولید یک داروی نوترکیب
Introduction & Objective: Bone morphogenetic proteins are a group of cytokines that belongs to superfamily TGFβ. These proteins play an important role in evolution of many of organs and tissues through germinal period followed by amending and rebuilding of bone tissue and car-tilage. The aim of this study was to clone and expression analysis of BMP-2 gene in E. coli bacteria. Materials & Method...
متن کاملتولید پروتئین نوترکیب gm-csf در باکتری e. coli
فاکتور رشد گرانولوسیتی-مونوسیتی انسانی(gm-csf)، گلیکوپروتیینی با وزن ملکولیkd 477/14 می باشد. ژن gm-csf بر روی کروموزوم شماره 5 انسانی (5q31.1) قرار دارد. این پروتئین باعث تحریک تکثیر و تمایز سلولهای زاینده گرانولوسیت و ماکروفاژ می شود. پروتئین gm-csfانسانی دارای 144 اسید آمینه می باشد که 17 اسید آمینه آن نقش سیگنال پپتید را برای پروتئین ایفا می نمایند. و تعداد 127 اسید آمینه آن به عنوان پروتئی...
15 صفحه اولکلونینگ و بررسی بیان ژن کد کننده bmp-۲ انسانی در باکتری e. coli به منظور تولید یک داروی نوترکیب
مقدمه و هدف: پروتئین های مورفوژنتیک استخوانی، گروهی از سایتوکاین های متعلق به ابرخانواده tgfβ می باشند. این پروتئین ها در تکامل بسیاری از ارگان ها و بافت ها، طی دوران جنینی و پس از آن در ترمیم و بازسازی بافت های استخوان و غضروف، نقش دارند. هدف از این مطالعه، کلونینگ و بررسی بیان این پروتئین در باکتری e.coli می باشد. روش کار: در این مطالعه تجربی توالی cdna مربوط به پپتید بالغ پروتئین مورفوژنتیک ...
متن کاملتولید کپسید پروتئینی ویروس موزائیک خیار در باکتری e. coli به منظور تولید آنتی بادی نوترکیب
ویروس موزاییک خیارcucumber mosaic cucumovirus (cmv) از خانواده bromoviridae یکی از مهمترین ویروس های بیمارگر کدوییان می باشد. جنس cucumovirus از خانواده bromoviridae دارای سه عضو، ویروس موزائیک خیار ((cmv، ویروس بی بذری گوجه فرنگی ((tav و ویروس کوتولگی بادام زمینی (psv) می باشد. cmv با پراکنش جهانی، وسیع ترین دامنه میزبانی را در بین ویروس های گیاهی داشته که در مزارع ایران نیز شیوع دارد و باعث ک...
15 صفحه اولمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
فیضجلد ۲۰، شماره ۵، صفحات ۴۴۷-۴۵۳
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023